表達IBDV VP2融合蛋白的重組MDV的構建及其免疫特性

將增強型綠色熒光蛋白基因(eGFP)與雞傳染性法氏囊病病毒(IBDV)的VP2基因融合,插入馬立克氏病毒(MDV)CVI988/Rispens的非必需區(qū)US10片段中,成功構建表達VP2融合蛋白的MDV CVI988轉移載體pUC18-US10-VP2.將轉移載體質粒與CVI988/Rispens疫苗毒共轉染雞胚成纖維細胞(CEF),篩選獲得表達VP2融合蛋白的重組MDV(rMDV).聚合酶鏈式反應(PCR)和間接免疫熒光實驗(IFA)證明,rMDV傳至第31代仍能穩(wěn)定表達VP2融合蛋白.用rMDV免疫SPF雞,進行IBDV攻毒保護試驗,1日齡SPF雞分別用1000PFU、2000PFU、5000PFU的rMDV進行免疫,33日齡用100LD50的IBDV JS超強毒進行攻毒,雞的免疫保護率分別為50%、60%、80%.值得注意的是,5000PFU的rMDV一次免疫1日齡SPF雞,其法氏囊組織病理損傷等級與IBD中等毒力活疫苗常規(guī)二次免疫相當(2.0/1.5),其保護效果無顯著差異(p＞0.05),而與非重組病毒免疫組相比較,保護效果差異顯著(P＜0.01),這表明構建的表達IBDV VP2融合蛋白的rMDV可以有效地為SPF雞提供免疫保護作用.

作 者： 劉紅梅 秦愛建 劉岳龍 金文杰 葉建強 陳鴻軍 邵紅霞 李迎曉 LIU Hong-Mei QIN Ai-Jian LIU Yue-Long JIN Wen-Jie YE Jian-Qiang CHEN Hong-Jun SHAO Hong-Xia LI Ying-Xiao   作者單位： 劉紅梅,LIU Hong-Mei(揚州大學江蘇省動物預防醫(yī)學重點實驗室,揚州,225009;安徽農業(yè)大學動物科技學院,合肥,230036)

秦愛建,劉岳龍,金文杰,葉建強,陳鴻軍,邵紅霞,李迎曉,QIN Ai-Jian,LIU Yue-Long,JIN Wen-Jie,YE Jian-Qiang,CHEN Hong-Jun,SHAO Hong-Xia,LI Ying-Xiao(揚州大學江蘇省動物預防醫(yī)學重點實驗室,揚州,225009) 

刊 名： 生物工程學報  ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2006 22(3)  分類號： Q78  關鍵詞： CVI988/Rispens   傳染性法氏囊病病毒   重組病毒   VP2  

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