丙酮對(duì)鋸緣青蟹N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶活力與構(gòu)象的影響

以丙酮為效應(yīng)物,研究其對(duì)鋸緣青蟹(Scylla serrata)N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶(NAGase)活力的影響,結(jié)果表明:該酶的剩余活力隨著丙酮濃度增大而呈指數(shù)下降,當(dāng)丙酮濃度達(dá)25%,酶的剩余活力僅為20%,說(shuō)明丙酮對(duì)青蟹NA-Gase有明顯的失活作用.導(dǎo)致酶活力喪失50%的丙酮濃度為7.5%.在較低丙酮濃度(＜10%)的失活是可逆的反應(yīng)過(guò)程.動(dòng)力學(xué)研究表明,該酶的失活過(guò)程屬于混合型,并進(jìn)一步測(cè)定游離酶(E)和酶底物絡(luò)合物(ES)與丙酮的結(jié)合常數(shù)(K1和K1s),分別為4.06%和10.49%,K1＜K1s,說(shuō)明底物存在對(duì)酶被丙酮的失活作用有一定的保護(hù)作用.應(yīng)用熒光發(fā)射光譜研究青蟹NAGase經(jīng)丙酮微擾后的分子構(gòu)象變化情況,結(jié)果表明:丙酮對(duì)酶分子構(gòu)象有顯著的影響,酶的內(nèi)源熒光強(qiáng)度隨丙酮濃度增大而降低,說(shuō)明酶分子中的生色基團(tuán)Trp和Tyr殘基的微環(huán)境發(fā)生了變化.

作 者： 楊學(xué)敏 王勤 謝進(jìn)金 張繼平 林建成 陳清西 YANG Xue-min WANG Qin XIE Jin-jin ZHANG Ji-ping LIN Jian-cheng CHEN Qing-xi   作者單位： 楊學(xué)敏,YANG Xue-min(漳州職業(yè)技術(shù)學(xué)院)

王勤,謝進(jìn)金,張繼平,林建成,陳清西,WANG Qin,XIE Jin-jin,ZHANG Ji-ping,LIN Jian-cheng,CHEN Qing-xi(廈門(mén)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,細(xì)胞生物學(xué)與腫瘤細(xì)胞工程教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,福建,廈門(mén),361005) 

刊 名： 廈門(mén)大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版）  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF XIAMEN UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE)  年，卷(期)： 2006 45(2)  分類(lèi)號(hào)： Q356.1  關(guān)鍵詞： 鋸緣青蟹   N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶   丙酮   失活作用   構(gòu)象變化  

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