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哈維氏弧菌外膜蛋白OmpK基因的克隆及原核表達
根據(jù)哈維氏弧菌外膜蛋白OmpK的基因序列設(shè)計一對引物,應(yīng)用聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)方法,從分離自患病大黃魚的哈維氏弧菌基因組中擴增獲得一段約800 bp的序列.將其克隆到pGEM-Teasy載體,測序結(jié)果證明該序列是哈維氏弧菌外膜蛋白OmpK基因.用PCR方法去除其信號肽序列,定向克隆到原核表達載體pGEX-4T-2構(gòu)建重組表達質(zhì)粒pGEX-4T-OmpK.IPTG誘導后能夠在大腸桿菌BL21中高效表達分子量約為53kD的GST-OmpK融合蛋白.用純化后的融合蛋白免疫新西蘭兔獲得了高效價的抗血清.Western-blotting分析表明,它與從哈維氏弧菌中提取的約27 kD的外膜蛋白能夠發(fā)生特異反應(yīng),提示外膜蛋白OmpK可能是哈維氏弧菌的重要保護性抗原之一.
作 者： 張崇文 于漣 毛芝娟 褚武英 錢榮華 ZHANG Chong-wen YU Lian MAO Zhi-juan CHU Wu-ying QIAN Rong-hua 作者單位： 張崇文,毛芝娟,褚武英,錢榮華,ZHANG Chong-wen,MAO Zhi-juan,CHU Wu-ying,QIAN Rong-hua(浙江大學生物醫(yī)學工程學院,浙江,杭州,310027;浙江大學動物預(yù)防醫(yī)學研究所,浙江,杭州,310029)于漣,YU Lian(浙江大學動物預(yù)防醫(yī)學研究所,浙江,杭州,310029)
刊 名： 水產(chǎn)學報 ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF FISHERIES OF CHINA 年，卷(期)： 2006 30(1) 分類號： Q78 Q936 關(guān)鍵詞： 哈維氏弧菌 外膜蛋白 OmpK 原核表達【哈維氏弧菌外膜蛋白OmpK基因的克隆及原核表達】相關(guān)文章：
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