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負載hTERT復制缺陷型腺病毒的包裝及鑒定

時間:2023-04-27 21:43:43 生物醫(yī)學論文 我要投稿
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負載hTERT復制缺陷型腺病毒的包裝及鑒定

目的: 構建負載人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(hTERT)基因的復制缺陷型腺病毒.方法: 將克隆有正義hTERT cDNA的腺病毒穿梭質(zhì)粒pDC315-hTERT與腺病毒包裝質(zhì)粒pBHGloxDeltaE1,3Cre共轉(zhuǎn)染人胚腎293細胞(HEK 293), 包裝負載hTERT基因的復制缺陷型腺病毒表達載體(Ad-hTERT). 對Ad-hTERT擴增、純化并濃縮后,進一步行感染性鑒定、電鏡鑒定及雙引物PCR鑒定. 結(jié)果: 純化濃縮后的Ad-hTERT滴度可達5×1012 pfu/L. 電鏡下可見在HEK 293細胞中形成的病毒顆粒,PCR雙引物鑒定Ad-hTERT可擴增出Ad及hTERT特異片段,而對照則不能擴出hTERT片段. 結(jié)論: 成功構建了負載hTERT基因的復制缺陷型腺病毒.

作 者: 陳陵 向國春 李向紅 蔡永國 李晶晶 房殿春 羅元輝 李志宏 楊仕明 CHEN Ling XIANG Guo-Chun LI Xiang-Hong CAI Yong-Guo LI Jin-Jin FANG Dian-Chun LUO Yuan-Hui LI Zhi-Hong YANG Shi-Ming   作者單位: 第三軍醫(yī)大學西南醫(yī)院全軍消化中心,重慶,400038  刊 名: 第四軍醫(yī)大學學報  ISTIC PKU 英文刊名: JOURNAL OF THE FOURTH MILITARY MEDICAL UNIVERSITY  年,卷(期): 2006 27(1)  分類號: Q756 Q753  關鍵詞: 人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶   腺病毒表達載體  

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