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乳糖誘導(dǎo)大腸桿菌中重組谷氨酰胺合成酶的表達(dá)
以重組枯草芽孢桿菌谷氨酰胺合成酶(L-谷氨酸:氨連接酶,Glutamine Synthetase,GS EC 6.3.1.2)蛋白表達(dá)宿主菌株BL21(DE3) (pET3C/谷氨酰胺合成酶)作為研究對(duì)象,借助SDS-PAGE分析方法,對(duì)于用乳糖誘導(dǎo)由T7lac啟動(dòng)子控制的重組目的產(chǎn)物蛋白的表達(dá)規(guī)律進(jìn)行了優(yōu)化研究,分別比較了最佳誘導(dǎo)起始生長(zhǎng)量、所需乳糖的濃度、誘導(dǎo)持續(xù)時(shí)間、補(bǔ)加乳糖和氨芐青霉素及不同培養(yǎng)基等參數(shù)對(duì)重組產(chǎn)物表達(dá)的影響.實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,對(duì)于T7lac啟動(dòng)子控制的重組目的產(chǎn)物,乳糖作為誘導(dǎo)劑也可以起到很好的誘導(dǎo)表達(dá)效果,誘導(dǎo)產(chǎn)物的表達(dá)量、可溶性及酶活與IPTG誘導(dǎo)產(chǎn)物基本接近.本研究結(jié)果為乳糖作為誘導(dǎo)劑應(yīng)用于重組大腸桿菌谷氨酰胺合成酶工業(yè)化生產(chǎn)提供了一定的參考依據(jù).
作 者: 劉俊紅 劉順誼 殷志敏 Liu Junhong Liu Shunyi Yin Zhimin 作者單位: 劉俊紅,Liu Junhong(安徽師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,安徽,蕪湖,241000;南京師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,江蘇,南京,210097)劉順誼,殷志敏,Liu Shunyi,Yin Zhimin(南京師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,江蘇,南京,210097)
刊 名: 南京師大學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版) ISTIC PKU 英文刊名: JOURNAL OF NANJING NORMAL UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE EDITION) 年,卷(期): 2006 29(3) 分類號(hào): Q78 關(guān)鍵詞: 谷氨酰胺合成酶 原核表達(dá) 乳糖 IPTG【乳糖誘導(dǎo)大腸桿菌中重組谷氨酰胺合成酶的表達(dá)】相關(guān)文章:
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