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透明顫菌血紅蛋白基因在產(chǎn)PHB重組大腸桿菌中的克隆表達(dá)
為解決高密度發(fā)酵培養(yǎng)過程中的供氧矛盾,在已經(jīng)成功構(gòu)建了λ噬菌體裂解基因(S-RRz)和PHB合成基因(phbCAB)同時(shí)有效表達(dá)的質(zhì)粒pTU14的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步探索將透明顫菌血紅蛋白基因(vgb)引入PHB生產(chǎn)的新途徑.設(shè)計(jì)vgb、S-RRz和phbCAB之間的不同克隆連接策略,并選用E.coli JM105為宿主,分別構(gòu)建三種外源基因同時(shí)表達(dá)的單質(zhì);蚬こ叹鶨.coli JM105(pTU14-vgb)、雙質(zhì);蚬こ叹鶨.coli JM105(pTU14,pWSK129-vgb)和vgb基因整合型單質(zhì)粒基因工程菌VG1(pTU14),并對(duì)其在LBG培養(yǎng)基中進(jìn)行初步篩選.結(jié)果表明,重組菌VG1(pTU14)是一株具有明顯生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)的優(yōu)選菌株.對(duì)VG1(pTU14)在LBG培養(yǎng)基中的補(bǔ)料分批培養(yǎng)進(jìn)一步表明,該重組菌不僅具有溶氧利用能力高、PHB產(chǎn)量和收率高的特點(diǎn),還具有可誘導(dǎo)裂解破壁的功能,因此是一株具有光明應(yīng)用前景的PHB高產(chǎn)基因工程菌.
作 者: 于慧敏 尹進(jìn) 李紅旗 楊勝利 沈忠耀 YU Huimin YIN Jin LI Hongqi YANG Shengli SHEN Zhongyao 作者單位: 于慧敏,尹進(jìn),李紅旗,沈忠耀,YU Huimin,YIN Jin,LI Hongqi,SHEN Zhongyao(清華大學(xué)化學(xué)工程系,生物化工研究所,北京,100084)楊勝利,YANG Shengli(中國(guó)科學(xué)院上海生物工程研究中心,上海,200233)
刊 名: 清華大學(xué)學(xué)報(bào) ISTIC EI PKU 英文刊名: JOURNAL OF TSINGHUA UNIVERSITY 年,卷(期): 2000 40(2) 分類號(hào): Q782 Q789 關(guān)鍵詞: 透明顫菌血紅蛋白基因 λ噬菌體裂解基因 聚β-羥基丁酸酯 基因工程大腸桿菌【透明顫菌血紅蛋白基因在產(chǎn)PHB重組大腸桿菌中的克隆表達(dá)】相關(guān)文章:
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