Sa抗原相關(guān)蛋白質(zhì)的研究

目的研究類風濕關(guān)節(jié)炎(RA)特異性抗Sa抗體識別的Sa抗原,探討Sa抗原的相關(guān)蛋白質(zhì).方法從人胎盤組織陰離子交換柱層析法純化Sa抗原,應用免疫印跡法檢測155例各種風濕病患者血清的抗Sa抗體,155例患者中類風濕關(guān)節(jié)炎71例,強直性脊柱炎11例、銀屑病關(guān)節(jié)炎7例、反應性關(guān)節(jié)炎7例、幼年特發(fā)性關(guān)節(jié)炎4例、骨性關(guān)節(jié)炎5例、風濕性多肌痛6例、痛風6例、系統(tǒng)性紅斑狼瘡7例、干燥綜合征10例、炎性肌病8例、混合性結(jié)締組織病4例、白塞病6例、成人Still病3例.切取與免疫印跡法陽性條帶相對應的電泳膠內(nèi)條帶,胰蛋白酶膠內(nèi)酶解,用高效液相色譜-電噴霧-離子阱質(zhì)譜鑒定目標蛋白質(zhì).以大腸桿菌重組表達目標蛋白質(zhì)作為抗原,以免疫印跡法檢測相應抗體.瓜氨酸化修飾重組蛋白質(zhì)作為抗原,以免疫印跡法檢測相應抗體.結(jié)果抗Sa抗體表現(xiàn)為相對分子質(zhì)量為50 000(和)55 000的陽性印跡條帶,在155例風濕病中,對RA的診斷敏感性和特異性分別為47.9%和95.2%.質(zhì)譜鑒定Sa抗原相關(guān)蛋白質(zhì)為波形蛋白(Vimentin).抗波形蛋白抗體在RA組與其他風濕病組的陽性率差異有統(tǒng)計學意義(P=0.005),對RA的診斷敏感性和特異性分別為36.6%和83.3%,但與抗Sa抗體的一致性差(Kappa=0.316).抗瓜氨酸化波形蛋白抗體陽性率在RA組較其他風濕病組高(P＜0.01),對RA的診斷敏感性和特異性分別為49.3%和86.9%,且與抗Sa抗體的一致性較高(Kappa=0.746).結(jié)論運用質(zhì)譜技術(shù)鑒定的Sa抗原相關(guān)蛋白質(zhì)波形蛋白,瓜氨酸化修飾后的抗原性與Sa抗原相仿,提示瓜氨酸化波形蛋白與Sa抗原密切相關(guān).

作 者： 陳華 姚志建 唐福林 CHEN Hua YAO Zhi-jian TANG Fu-lin   作者單位： 陳華,唐福林,CHEN Hua,TANG Fu-lin(100730,中國醫(yī)學科學院,中國協(xié)和醫(yī)科大學,北京協(xié)和醫(yī)院風濕免疫科)

姚志建,YAO Zhi-jian(國家人類基因組北方研究中心) 

刊 名： 中華醫(yī)學雜志  ISTIC PKU 英文刊名： NATIONAL MEDICAL JOURNAL OF CHINA  年，卷(期)： 2006 86(27)  分類號： Q5  關(guān)鍵詞： 類風濕關(guān)節(jié)炎   抗體   抗原   波形蛋白   質(zhì)譜  

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