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植物核蛋白提取方法
植物核蛋白提取試劑盒
產品組成:
產品組成 規(guī)格 植物核提取液A 植物核提取液B 蛋白酶抑制劑混合物
說明書
BB-3154-1 50 assays 25ml 10ml 250ul 一份
BB-3154-2 100 assays
50ml 20ml 500ul 一份
儲存條件:
蛋白提取液,磷酸酶抑制劑2-8℃保存; 蛋白酶抑制劑-20℃保存。
有效期:
一年。
產品簡介:
貝博植物核蛋白提取試劑盒提供配套試劑,適用于從各種植物細胞和各種實體植物組織,如葉片、根、種子等植物組織中提取核蛋白。提取過程簡單方便,可在1小時內完成。制備的核蛋白不僅純度高,保持天然活性,而且絕少交叉污染。提取的蛋白可用于Western Blotting、轉錄活性分析、Gel shift凝膠阻滯實驗、免疫共沉淀、酶活性測定等蛋白研究。
使用方法:
1. 提取液制備:每500ul預冷的核蛋白提取液A和200ul提取液B中分別加入2ul
蛋白酶抑制劑混合物,混勻后置冰上備用。
2. 取洗凈擦干后并去除葉梗和粗脈的200mg植物組織樣本剪碎,采用以下一種方
法處理:
i. 加入500ul提取液A后用勻漿機/勻漿器勻漿。
ii. 置于研缽中用液氮研磨,研磨后加入500μl冷的提取液 A。 iii. 加入500ul提取液A直接置冰上研磨。
3. 高速渦旋振蕩5秒,然后在4℃,100×g力條件下離心1分鐘。 4. 收集上清,棄沉淀。
5. 將上清在4℃,800×g力條件下離心1分鐘。 6. 棄上清,收集沉淀。
7. 在沉淀中加入200μl冷的提取液B,高速渦旋振蕩15秒。 8. 置冰上40分鐘,每隔10分鐘高速渦旋振蕩15秒。 9. 在4℃,16000×g條件下離心10分鐘。
10. 快速將上清吸入另一預冷的干凈離心管,即可得到核蛋白。
①②
11. 將上述蛋白提取物定量后分裝于-80℃冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌嶒灐?/p>
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