不同方法測定黃嘌呤對Bacillus fastidiosus胞外尿酸酶抑制效力的比較

篩選酶抑制劑常需測定米氏常數(shù)(Km)和最大反應(yīng)速度(Vm)來確定抑制常數(shù)(Ki)[1,2].雙倒數(shù)分析法測定Ki效率低,且靶酶Km越高則成本越高.積分法[3,4]和線性動力學(xué)法[5,6]測定Ki所需底物濃度都高于Km,至今對高Km靶酶都測定極低底物濃度下的半抑制濃度,或再換算成抑制常數(shù)表示抑制效力.但測定低濃度底物下的初速度要求高靈敏度的定量方法.實際上在低濃度底物下用簡化積分法也可測定Ki[7].Bacillusfastidiosus胞外尿酸酶Km接近0.2 mmol/L,黃嘌呤是其競爭性抑制劑[4～6].本文用低濃度尿酸,比較測定初速度確定黃嘌呤半抑制濃度和簡化積分法測定黃嘌呤抑制常數(shù)的差異.

作 者： 趙利娜 趙運勝 陶佳 廖飛   作者單位： 重慶醫(yī)科大學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室,重慶,400016  刊 名： 重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF CHONGQING MEDICAL UNIVERSITY  年，卷(期)： 2006 31(3)  分類號： Q55 Q555.8  關(guān)鍵詞：  

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