泌尿生殖道支原體和衣原體檢測的現(xiàn)狀和存在問題
[關(guān)鍵詞] 支原體 衣原體 檢測
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[摘 要］對泌尿生殖道支原體和衣原體檢測的現(xiàn)狀進行綜述，著重分析目前支原體和衣原體檢測中存在的亟待解決的問題。? 解脲脲原體（UU）、人型支原體（MH）、生殖支原體（MG）和沙眼衣原體（CT）都是寄生在泌尿生殖道的病原體，常引起泌尿生殖道疾患。支原體和衣原體感染不但是非淋菌性尿道炎（NGU）的最主要病因(90%以上)，且已成為發(fā)病率最高的性傳播疾病，已越來越受到重視。但由于技術(shù)局限，目前對其檢測仍存在不少問題亟待解決。筆者結(jié)合自己的工作經(jīng)驗，綜述并分析泌尿生殖道支原體和衣原體檢測的現(xiàn)狀和存在問題，以裨于試劑的改進和臨床檢測方法的提高。?1 檢測現(xiàn)狀 1.1 培養(yǎng)法 支原體可用人工合成培養(yǎng)基培養(yǎng)，由于不具有甾醇合成能力，培養(yǎng)系統(tǒng)應(yīng)添加含甾醇等長鏈不飽和脂肪醇豐富的物質(zhì)，一般采用SP?4培養(yǎng)基加馬血清。MG生長所需的營養(yǎng)成分復(fù)雜，生長極緩慢，一般需2周～3月。CT必須采用細胞培養(yǎng)，一般用McCoy細胞系進行培養(yǎng)，但細胞培養(yǎng)需專業(yè)化技術(shù)、試劑和設(shè)備，要求較高，周期也較長，目前臨床一般不采用，僅在科研單位進行科研活動，或作為新診斷試劑方法學評價的金標準。培養(yǎng)法不能快速檢測支原體感染，一般UU和MH需2～3天才能出結(jié)果。不過隨著實驗水平提高，市面上已出現(xiàn)一些24 h可出結(jié)果的試劑。但MG尚未實現(xiàn)24 h培養(yǎng)出結(jié)果，因此臨床上不采用培養(yǎng)法檢測MG，僅用于科研活動。 目前臨床培養(yǎng)法檢測UU和MH多采用液體培養(yǎng)基，加樣培養(yǎng)變色判斷結(jié)果。理論上這種變色也可能由于其它微生物代謝而發(fā)生，因此要求變色后過濾除菌，再接種到固體培養(yǎng)基上觀察菌落。若培養(yǎng)基選用適當抗生素，有效地抑制雜菌生長，單純液體培養(yǎng)基結(jié)果就有相當高的臨床可信度。即使有個別變色是雜菌所致，標本病人也有細菌性炎癥，采用抗生素也不為過。 1.2 免疫法 采用此法檢測的試劑目前臨床較常用。一般為間接法（ELISA法或金標法）檢測抗體，比較而言金標法檢測抗體的試劑用得更多；而用于檢測支原體抗原的試劑目前尚未商品化。此類試劑一般采用夾心法檢測CT特異性脂多糖抗原(LPS)，影響較大的有金標試劑和免疫熒光試劑。由于免疫反應(yīng)的特異性和酶催化底物反應(yīng)的高效性或熒光信號的高敏性，故此類試劑理論上靈敏度和特異性都較高。 1.3 PCR法 此類衣原體試劑有定性和定量（多是PCR酶免試劑）兩類，而支原體試劑只有定性一類。PCR反應(yīng)有較高的靈敏度，對實驗條件、試劑以及操作人員的要求都較高，操作不當易造成錯誤判斷，并且PCR定性試劑一般沒有藥品批準文號，臨床上使用應(yīng)慎重。定量試劑有藥品批準文號，但面市不久，尚處于推廣中�？蒲袉挝皇褂肞CR試劑一般用于鑒定血清型，而醫(yī)療單位使用PCR定量試劑多用于臨床療效觀察。 1.4 快速生化法 由于支原體生化酶反應(yīng)速度和特異性都存在問題，目前尚無檢測支原體快速生化法試劑，但衣原體已有此方法學試劑。國內(nèi)開發(fā)的生殖道CT生化檢測試劑即為此類，它是根據(jù)CT侵染上皮細胞后產(chǎn)生的獨特的化學結(jié)構(gòu)，配以生化酶試劑與之反應(yīng)，觀察變色與否判斷結(jié)果。臨床觀察資料表明，以細胞培養(yǎng)為金標準，此試劑的靈敏度和特異性分別為87%以上和97%以上，加之價格較低，具有良好的應(yīng)用前景。2 存在問題 2.1 由于支原體在人群中廣泛存在，許多正常人也有低滴度抗體水平，單純根據(jù)一次抗體檢測結(jié)果，很難判斷標本病人是既往感染還是現(xiàn)癥感染，再次測定支原體抗體
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