利用改進(jìn)的Oligo-capping法構(gòu)建手掌參全長(zhǎng)cDNA文庫(kù)

Oligo-capping法是構(gòu)建全長(zhǎng)cDNA文庫(kù)的重要方法之一.以名貴中藥手掌參(Gymnadenia conopsea R.Br.)的幼芽組織為材料,通過減少mRNA的用量,用pUC18作載體,設(shè)計(jì)特異引物對(duì)第1鏈cDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增,按片段大小分級(jí)回收cDNA,形成了一種以O(shè)ligo-capping法為基礎(chǔ),構(gòu)建珍稀材料全長(zhǎng)cDNA文庫(kù)的快速、簡(jiǎn)單的技術(shù)體系.利用該方法,首次成功地構(gòu)建了手掌參的全長(zhǎng)cDNA文庫(kù).經(jīng)綜合評(píng)價(jià),文庫(kù)容量達(dá)到了8×105個(gè)/μg cDNA,全長(zhǎng)cDNA比例達(dá)到68%,重組率超過96%,說明本實(shí)驗(yàn)的改進(jìn)非常成功.該文庫(kù)的建成為手掌參的遺傳資源保護(hù)和功能基因發(fā)掘等理論與應(yīng)用研究奠定了基礎(chǔ).

作 者： 周建平 楊足君 白麗莉 馮娟 李光蓉 鄧科君 任正隆 ZHOU Jian-ping YANG Zu-jun BAI Li-li FENG Juan LI Guang-rong DEN Ke-jun REN Zheng-long   作者單位： 中國(guó)電子科技大學(xué),生命與技術(shù)學(xué)院,成都,610054  刊 名： 西北植物學(xué)報(bào)  ISTIC PKU 英文刊名： ACTA BOTANICA BOREALI-OCCIDENTALIA SINICA  年，卷(期)： 2006 26(9)  分類號(hào)： Q343.1  關(guān)鍵詞： 全長(zhǎng)cDNA文庫(kù)   Oligo-capping法   手掌參  

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