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細(xì)胞培養(yǎng)皿
細(xì)胞培養(yǎng)皿【轉(zhuǎn)】
一次性細(xì)胞培養(yǎng)皿等標(biāo)明 “Tissue Culture Treated”是什么意思? 大部分動物細(xì)胞需要貼附在一個固相界面上才能生長。而只有親水的固相界面,細(xì)胞才能貼附。
最早的細(xì)胞培養(yǎng)器皿是由玻璃制作的。由于玻璃的表面是親水的,不經(jīng)過特殊的處理,普通的細(xì)胞就可以貼附生長。 聚苯乙烯透光性能好,具有較好的強度和易塑性,并且沒有毒性,成為一次性細(xì)胞培養(yǎng)皿和培養(yǎng)板等一次性細(xì)胞培養(yǎng)耗材的首選材料(一般的磁帶和CD盒也是用聚苯乙烯制成的)。然而聚苯乙烯表面是憎水的,所以需要經(jīng)過表面的改性處理,變成親水后才能適用于細(xì)胞培養(yǎng)。
一次性細(xì)胞培養(yǎng)皿等標(biāo)明“Tissue culture treated”,是表示該器皿經(jīng)過表面的改性處理,適合貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。而懸浮生長的細(xì)胞,就不一定需要這樣經(jīng)過特殊處理過的器皿。但經(jīng)過表面的改性處理后的細(xì)胞培養(yǎng)皿等一般也適合懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)。
細(xì)胞培養(yǎng)中邊緣效應(yīng)和解決辦法
細(xì)胞培養(yǎng)中的邊緣效應(yīng)是指在使用多孔板的細(xì)胞培養(yǎng)
中,在周邊孔中的細(xì)胞會集中在孔的外側(cè),如左圖所示(孔
內(nèi)白亮的為細(xì)胞集中的區(qū)域)。這種現(xiàn)象在實驗中常用的
96孔板中十分明顯。
由于大多細(xì)胞的生長會受周圍接觸細(xì)胞的抑制,所以
邊緣效應(yīng)導(dǎo)致邊緣孔內(nèi)細(xì)胞平均生長速度要比其他孔來得
慢,從而在實驗過程中引入系統(tǒng)誤差。在很多大規(guī)模藥物篩選實驗中,人們甚至棄去周圍孔的實驗結(jié)果。
邊緣效應(yīng)是由于在室溫下的培養(yǎng)板轉(zhuǎn)移到37℃培養(yǎng)箱后,培養(yǎng)板上產(chǎn)生的溫度差影響細(xì)胞沉降引起的。所以解決邊緣效應(yīng)的一個簡單有效的方法,就是在培養(yǎng)板內(nèi)分入細(xì)胞后,在室溫下放置1-2個小時,讓細(xì)胞在沒有溫細(xì)胞培養(yǎng)皿度差的情況下沉降,然后再轉(zhuǎn)移到37℃培養(yǎng)箱內(nèi)(1)。該方法至少適合CHO等在室溫下能貼壁的細(xì)胞。
1. BETINA KERSTIN LUNDHOLT, KURT M. SCUDDER, and LEN PAGLIARO, A Simple Technique for Reducing Edge Effect in Cell-Based Assays. Journal of Biomolecular Screening 2003:566-570
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